Rehabilitacja i fizjoterapia
Zdrowy wzrok i jego korygowanie

Ekspresja izoformy ERCC1 i naprawa DNA w niedrobnokomórkowym raku płuc AD 6

Posted in Uncategorized  by admin
September 12th, 2018

Ze względu na homologię sekwencji nie było możliwe opracowanie starterów specyficznych dla ERCC1-202; stąd izoformy ERCC1-202 i ERCC1-204 wykryto razem. Mapa ciepła i dwuwymiarowe hierarchiczne grupowanie wykazały, że względne poziomy ekspresji izoform różniły się w zależności od guza (ryc. S5B w dodatku uzupełniającym). Analiza przeżycia według poziomu mRNA ERCC1-202 i ERCC1-204 w nowotworach sugerowała, że poziom mRNA nie był związany ani z całkowitym przeżyciem (P = 0,76) (ryc. S5C w dodatkowym dodatku) ani z czasem przeżycia bez progresji (P = 0,33) (ryc. S5D w dodatkowym dodatku). Nie stwierdzono istotnej interakcji między ekspresją mRNA izoformy ERCC1 a podtypem histologicznym NSCLC. Zbadaliśmy także ekspresję izoform na poziomie białka przy użyciu analizy Western blot w liniach komórkowych (ryc. S5E w dodatkowym dodatku) i próbki uzyskane od pacjentów z NSCLC (ryc. S5F w dodatkowym dodatku). W tych próbkach wykryto izoformy ERCC1-202, ERCC1-203 i ERCC1-204, ale wykrycie ERCC1-201 było rzadkie. Nasze wyniki pokazują, że transkrypty izoformy ERCC1 i białka są heterogenicznie eksprymowane w liniach komórkowych i próbkach nowotworowych. Dlatego istotne jest scharakteryzowanie ich odpowiedniej funkcjonalności w odniesieniu do naprawy adduktów platyny-DNA w celu uniknięcia błędnej klasyfikacji guzów wyrażających wysoki poziom niefunkcjonalnego ERCC1.
ERCC1-202 i wrażliwość komórek na cisplatynę
Najpierw znokautowaliśmy gen ERCC1 i uzyskaliśmy siedem klonów A549 bez wykrywalnego białka ERCC1 za pomocą analizy Western blot (zmniejszenie ekspresji ERCC1 o 85 do 95% w porównaniu z komórkami macierzystymi A549 dzikiego typu) (Fig. S6A w dodatkowym dodatku ) oraz z kodowaniem mutacji we wszystkich genomowych kopiach genu ERCC1 (ryc. S6B w dodatkowym dodatku). Zaobserwowaliśmy znaczny wzrost (40%) w akumulacji adduktów platyny-DNA w komórkach z niedoborem ERCC1 w porównaniu z komórkami rodzicielskimi typu dzikiego, co sugeruje zmniejszenie szybkości naprawy wycinków nukleotydowych (ryc. S6C w dodatkowym dodatku) . Ponadto stężenie hamujące cisplatynę o 50% zostało zmniejszone o siedem razy w porównaniu z wartością w komórkach typu dzikiego (ryc. S6D w dodatku uzupełniającym). Zmniejszona funkcja naprawy DNA klonów z brakiem ERCC1, a następnie obniżenie stężenia hamującego o 50% potwierdziło ważną rolę ERCC1 w naprawie adduktów platyny-DNA i wrażliwości na cisplatynę.
Figura 4. Figura 4. Pojemność izoform białkowych ERCC1 w celu umożliwienia naprawy nukleotydowej i odporności na cisplatynę
[więcej w: stomatologia warszawa gocław, chlorella działanie, implanty ortodontyczne ]

Tags: , ,

Komantarze do artykulu sa obecnie zamkniete, popros administratora strony o ich otwarcie jesli chcesz wziasc udzial w dyskusji pod artykulem. Kontakt do administracji w zakladce kontakt.(Mozliwe jest rowniez przeslanie propozycji tematow ktore mozemy uwzglednic w nastepnych naszych artykulach, bedziemy wdzieczni za wasze cenne sugestie i postaramy sie je wykorzystac przy kolejnych wpisach.)

Powiązane tematy z artykułem: chlorella działanie implanty ortodontyczne stomatologia warszawa gocław