Rehabilitacja i fizjoterapia
Zdrowy wzrok i jego korygowanie

Ekspresja izoformy ERCC1 i naprawa DNA w niedrobnokomórkowym raku płuc AD 7

Posted in Uncategorized  by admin
September 12th, 2018

Panel A pokazuje wyniki analizy dot-blot i kwantyfikacji usuwania adduktów cisplatyna-DNA 24 godziny po 2-godzinnym traktowaniu cisplatyną w stężeniu 25 .mol na litr w klonach A549 typu dzikiego, pozbawionych ERCC1 216 i 375 ( wektor kontrolny) i komórki wyrażające pojedyncze izoformy ERCC1 (201, 202, 203 lub 204). Stosunek ilości adduktu (stosunek liczby adduktów w ciągu 24 godzin do liczby po 0 godzinach) w komórkach dzikiego typu A549 ustalono na 1. Panel B pokazuje kontrolę ekspresji konstruktu izoform w ustalonych liniach komórkowych ERCC1 z 8F1 i .. przeciwciała-aktyny. Panel C pokazuje względne objętości guza w trakcie leczenia po tym, jak 106 komórek pozbawionych ERCC1, z ekspresją pojedynczej izoformy, wstrzyknięto podskórnie myszom nagim. Dwa razy w tygodniu mierzono guzy i wstrzykiwano dootrzewnowo cisplatynę w dawce mg na kilogram masy ciała. Paski I reprezentują 95% przedziały ufności. Panel D pokazuje wyniki krótkoterminowego testu wzrostu komórek A549 typu dzikiego, z niedoborem ERCC1 i komórek z ekspresją izoform, traktowanych przez 48 godzin rosnącymi dawkami cisplatyny. Liczby powyżej słupków reprezentują stężenie hamujące 50% cisplatyny. Gwiazdki wskazują na znaczne różnice w stosunku do komórek typu dzikiego (P <0,05). Paski I reprezentują 95% przedziały ufności. Aby wytworzyć komórki z nadekspresją pojedynczej izoformy, dwa klony z brakiem ERCC1, 216 i 375, zainfekowano lentiwirusowymi konstruktami kodującymi różne izoformy (201, 202, 203 i 204) lub pustym (kontrolnym) wektorem. Kolejna ocena skuteczności naprawy DNA u klonów wykazujących ekspresję izoformy wykazała, że skuteczność naprawy utrzymywała się tylko w komórkach z ektopową ponowną ekspresją izoformy ERCC1-202. Ponowna ekspresja innych izoform nie przyspieszyła redukcji ilości adduktów cisplatyna-DNA (Figura 4A) .34 Eksperymenty kontrolne pojedynczej ekspresji każdej izoformy przedstawiono na Figurze 4B. Po leczeniu cisplatyną oporność komórek uratowano za pomocą ponownej ekspresji izoformy ERCC1-202 zarówno w krótkoterminowych eksperymentach (48 godzin) (ryc. 4C w dodatkowym dodatku), jak i długotrwałych eksperymentach (15 dni) (ryc. S7A w dodatkowym dodatku ). Obserwacje te zostały potwierdzone, gdy zmierzono apoptozę indukowaną cisplatyną, ponieważ tylko reekspresja izoformy ERCC1-202 uniemożliwiła aktywację kaspaz 3 i 7 podczas inkubacji cisplatyny (ryc. S7B w dodatku uzupełniającym). Odkrycia były podobne w eksperymentach in vivo, w których klony wstrzyknięto myszom nagim. Wyniki u leczonych myszy pokazano na fig. 4D, a wyniki dla nieleczonych myszy pokazano na fig. S7C w dodatkowym dodatku. Odkrycia te sugerują, że izoforma ERCC1-202 była unikalną funkcjonalną izoformą białkową.
Dyskusja
Wartości prognostyczne i prognostyczne ekspresji ERCC1 badano w wielu guzach litych
[patrz też: bliznowiec po operacji, centrum medyczne rzeszów, chlorella działanie ]

Tags: , ,

Komantarze do artykulu sa obecnie zamkniete, popros administratora strony o ich otwarcie jesli chcesz wziasc udzial w dyskusji pod artykulem. Kontakt do administracji w zakladce kontakt.(Mozliwe jest rowniez przeslanie propozycji tematow ktore mozemy uwzglednic w nastepnych naszych artykulach, bedziemy wdzieczni za wasze cenne sugestie i postaramy sie je wykorzystac przy kolejnych wpisach.)

Powiązane tematy z artykułem: bliznowiec po operacji centrum medyczne rzeszów chlorella działanie